Японские ученые применили метод геномного редактирования для инактивации вируса иммунодефицита человека - Гранит науки - 2018-05-24

Разрушив регуляторные гены вируса, вызывающего СПИД, посредством системы геномного редактирования CRISPR/Cas9, группа исследователей из Университета Кобе (Kobe University) заблокировала воспроизведение частиц ВИЧ инфицированными клетками, о чем сообщает статья в Scientific Reports. Поражение вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ-1) – это хроническое заболевание, которое в мире диагностировано у 35 с лишним миллионов человек. Уровень инфекции можно контролировать антиретровирусными препаратами, но полного излечения не бывает. Одна из основных проблем заключается в невозможности удалить клетки с латентной, еще не проявившейся ВИЧ-инфекцией: по мере размножения вируса его гены внедряются в хромосомы зараженных клеток и воспроизводятся вместе с генетическим материалом клетки, до поры ничем себя не выдавая. Применяющаяся с недавних пор система геномного редактирования CRISPR/Cas9 представляется японским ученым перспективным инструментом для инактивации генов ВИЧ, встраивающихся в хромосомы пораженных этим вирусом людей: она разрезает гены в определенных местах, что позволяет удалять или добавлять участки ДНК. Исследователи из Кобе нацелились на два гена, которые регулируют размножение ВИЧ, эти гены называются tat и rev. Исходя из генетической информации о шести основных подтипах вируса иммунодефицита человека, они сконструировали шесть типов направляющей РНК, которая обеспечивает специфичность редактирования системой CRISPR/Cas9.

Дальше ученые создали вектор – специальную конструкцию на основе особого вируса с длинным инкубационным периодом, лентивируса, несущего гены разрезающего фермента Cas9 и направляющую РНК. При внесении такого вектора с редактирующей системой в культуру клеток, которые производили продукты генов tat и rev, авторы добились существенного снижения активности генов-мишеней, и, соответственно, уровня их продуктов. Никаких побочных, нежелательных мутаций при этом не наблюдалось, равно как и изменения в выживаемости культивируемых клеток. Вводя редактирующую систему в культуру клеток с латентной или постоянной ВИЧ-инфекцией, авторы заметно подавили реактивацию ВИЧ, зависимую от белков иммунной системы цитокинов, а также воспроизведение вирусного материала в хронически инфицированных клетках. Более того, одновременное внесение всех шести типов РНК-проводника почти полностью заблокировало продукцию вируса инфицированными клетками. Новости мировой науки вы найдете также на странице нашей программы в газете научного сообщества «Поиск».